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Pull Down Assay

服務簡介

GST-pull-down

利用GST融合蛋白沈降技術,將靶蛋白與GST標簽蛋白進行融合表達,純化獲取融合表達蛋白。靶蛋白-GST融合蛋白親和固化在谷胱甘肽親和樹脂上,作爲與目的反比親和的支撐物,充當誘餌蛋白,目的蛋白溶液過柱純化,即可捕獲與之相互作用的俘獲蛋白,洗脫結合物,通過SDS-page電泳分析,或聯用WB和MS檢測,可驗證蛋白間的相互作用或篩選獲取相應的目的蛋白。

RNA/DNA pull-down

Pull down是检测RNA/DNA结合蛋白与其靶RNA/DNA之间相互作用的主要实验手段之一。用生物素标记RNA/DNA 探针,与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA/DNA—蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过Western Blot实验检测特定的RNA/DNA结合蛋白是否与RNA/DNA相互作用,还可以对该蛋白进行质谱(MS)鉴定蛋白质类型。

主要流程

GST-pull-down

构建GST-靶蛋白融合表达载体 WB检测融合蛋白的表达 获取总蛋白裂解液 GST-pull-down调取互作结合蛋白 对结合蛋白进行纯化与分析

RNA/DNA pull-down

RNA/DNA生物素探针制备 细胞裂解液制备 .获取总蛋白裂解液 pull-down调取互作结合蛋白 对结合蛋白进行纯化与分析

訂購信息

服務項目

說明

周期

報價

GST-pull down

通过磁珠结合捕获,形成复合体形式,更加灵敏和针对性获取结合蛋白:磁珠与GST抗體孵育结合,通过与样品裂解液孵育,形成磁珠-GST抗體-GST融合蛋白-互作结合蛋白综合体,进而纯化获取目的结合蛋白.

8~10周

詳細

RNA pull down

需要相關文獻及客戶的要求,根據基因序列進行DNA序列T克隆,做外轉錄成RNA,再進行生物素標記,與細胞裂解液結合分離結合蛋白。

8周

DNA pull down

可以直接合成生物素標記DNA探針,與細胞裂解液結合,磁珠法篩選分離離結合蛋白。

4~6周

GST-pull-down

客戶提供

提供樣品
1) 构建表达纯化靶蛋白与相关诱饵蛋白(也可由公司构建)或含诱饵蛋白的细胞样品
2) 可用于WB检测和IP实验的GST标签抗體

最終交付

交付結果
1) 原始数据、结果图片
2) 标准实验报告(含实验步骤、流程及试剂耗材厂家)
 

RNA/DNA pull-down

客戶提供

提供樣品
1) 需检测的细胞样品
提供信息
1) 目的基因信息;
2) 目的蛋白信息;
3) 一抗及其說明书

最終交付

交付結果
1) 原始数据、结果图片
2) 标准实验报告(含实验步骤、流程及试剂耗材厂家)